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全自动蛋白质免疫印迹杂交系统(Precision Blosystems BlotCycler)
2015-03-23   本站 审核人:

一、使用规程

1.在使用本仪器之前,请确定已完成电泳实验并将蛋白质转印到膜上,本仪器将自动完成:震荡、封闭、杂交和一抗回收;

2.实验开始前需要准备以下试剂:

(1)封闭液/blot 12-18 mL

(2)一抗/blot 11-15 mL

(3)二抗/blot 12-18 mL

(4)洗涤液 最高3.5 L(取决于转印膜的数量)

3.打开孵育盒的盖子,放入转印膜,给每个放入膜的孵育盒(1-6)分别添加封闭液12-18ml,盖上盖子;

4.打开顶部的盖子,在标记“P”的容器(P1-P6)中添加一抗溶液各11-15 mL,在标记“S”的容器(S1-S6)中添加二抗溶液各12-18 mL,注意和孵育盒标号的对应;

5.在槽中,加适量的洗涤液,盖上顶部盖子;

6.放置一抗回收瓶。放置废液收集容器,高度要低于仪器;

7.设置参数:显示屏分为左、右两部分,左边显示对应的是有关标号1-3的孵育盒,一抗、二抗容器的自动操作,右边显示则对应的是有关标号4-6的孵育盒,一抗、二抗容器的自动操作;

(1)设置1-3封闭时间,一抗、二抗孵育时间:长按2s,第一行显示闪烁后,按选择参数项,按使数值变为00000,再次按选中,按增加或减少数值,按确定;

(2)设置1-3洗涤的次数,操作同上;

(3)设置4-6封闭时间,一抗、二抗孵育时间,操作同上;

(4)设置4-6洗涤的次数,操作同上。

9.检查确认所有参数无误,按F1开始左侧1-3的循环,等待至少1 min后,按F2开始右侧4-6的循环;

10.在运行停止后,需清洗仪器。移出所有的膜和一抗回收瓶,打开顶盖,将洗涤液灌满设备(最少要2L),并轻按F3检查洗涤液的液面高度。长按F3后,再按F1将会清洗仪器左侧标号1-3的容器及管道;长按F3后,再按F2将会清洗仪器右侧4-6的容器及管道。

二、注意事项

1.如果长时间不用,在使用前请用去离子水先运行清洗程序;

2.清洗仪器后,如有多余的洗涤液,请拔出泵间的塞子,移掉槽子里的洗涤液;

3.请确保有足够的洗涤液,否则泵会损坏。

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