一、操作规程
1.打开成像仪器电源(左后侧)和CCD电源(黑色),预热15min,打开电脑电源;
2.将样品放入样品台,并根据实际需要在主机上选择相应光源;
3.双击桌面上Quantity One图标,打开Quantity One软件,或从开始-程序-The Discovery Series/Quantity One进入;
4.从File下拉菜单栏中选择ChemiDoc XRS...,打开图像采集窗口;
5.Select Application选择相关应用:
(1)UV Transillumination透射紫外光:针对DNA EB胶或其他荧光样品;
(2)White Transillumination透射白光:针对透光样品如蛋白凝胶,X-光片;
(3)White Epillumination侧面白光:针对不透光样品或蛋白凝胶;
(4)Chemilumiescence:针对信号较强的化学发光样品;
(5)Chemi Hi Sensitivity:针对信号较弱的化学发光样品。
6.单击Live/Focus按钮,激活实时调节功能,此功能有三个上下键按钮:IRIS(光圈),ZOOM(缩放),FOCUS(聚焦),可在软件上直接调节或在仪器面板上手工调节,调节步骤:调节IRIS至合适大小→点ZOOM,将样品图形适当放大→调节FOCUS,至图像最清晰;
7.如果是DNA EB胶或其他荧光或蛋白凝胶,单击Auto Expose,系统将自动选择曝光时间成像,如不满意,单击Manual Expose,并输入曝光时间(秒),图像满意后保存;
8.如是化学发光,在Select Application下选择Chemiluminescence或Chemi Hi Sensitivity(如样品强度较弱),先打开Epi-White侧面白光,同第5步调节清楚膜的聚焦状态(如膜上没有可对焦的标记,可用记号笔做个小记号)。然后关闭光源,不打开任何光源,将滤光片位置换到空位,并将光圈Iris开到最大,选择Auto Expose自动曝光,或输入Manual Expose时间,可对化学发光的弱信号进行长时间积累时间长短,采集几帧图像,在采集的多帧图像中选取满意的保存。
二、注意事项
1.化学发光是特别弱的发光,所以曝光可能较长;
2.做完化学发光,务必将滤光片放回原位;
3.使用完毕后,将样品台上的液体擦拭干净,并做好登记;
4.注意将电源关闭。