一、操作规程

半干转印槽用于快速高效的蛋白和核酸的转印。

1．准备好转印缓冲液（不同样品缓冲配方不同），把凝胶在缓冲中平衡20-60分钟；

2．剪好合适尺寸的转印膜，在缓冲中浸5-10分钟；

3．剪好合适尺寸的滤纸（2张增厚滤纸或4张厚滤纸或6张薄滤纸）用缓冲液浸；

4．在阳极平板上根据图中顺序做好转印三明治，注意不能有气泡；

5．装好阴极平板，合上安全盖；

6．接上合适的电泳仪开始转印。注意电极连接（正对正，负对负）根据不同的蛋白摸索最合适的转印条件。常规推荐:小胶用10 V 30 minutes或15 V 15 minutes。大胶用25 V 30 minutes或15 V 60 minutes。

7.关闭电泳仪，打开安全盖和阴极电极，取出转印膜。

二、注意事项

1.使用的 大胶不要超过25 V电压和3 mA/cm2电流，小胶电流不要超过5.5 mA/cm2；

2.对于一些用酸性缓冲液的转印，需把凝胶放在膜上，其他同上；

3.常见缓冲液配方：

（1）Tow bin缓冲（SDS蛋白，硝酸纤维素膜，Zeta-Probe膜）：25mM Tris，192mM Glycine(20%methanol)，pH8.3；

（2）DNA转印缓冲(Zeta-Probe膜)：0.5xTBE。