一、操作规程

1.仪器启动

（1）电脑开机，并打开定量PCR仪底座开关；

（2）启动CFX Manager软件，点击左侧Open Lid开盖。

2.放置样品

（1）将PCR反应体系加入到0.2ml低缘八联管，盖上管盖；或加入低缘96孔板，用光学级封膜封好；

（2）将准备好的反应管按顺序放入加热孔中；

（3）点击Close Lid关盖。

※注：必须带一次性塑料手套，勿让手指接触到反应管表面。

3.设置程序，仪器运行

（1）点击Edit或Create New键，按实验需求设置热循环程序文件（Protocol Tab）；

（2）设置反应板文件（Plate Tab），选择本次实验所要使用的荧光染料种类；单击样品类型；如要某些反应孔第一荧光染料对应的样品类型为标准品（Standard），点“Dilution Series”键可设置其原始靶核酸数量及稀释倍数；

（3）点击“Start Run”键，保存并运行程序。

4.结果分析

（1）PCR反应结束后，软件会自动计算标准曲线和Ct值等；

（2）如需进行表达量分析、等位基因分析，可在软件窗口选择相应分析功能

（3）点击右上方的“Report”键，可输出结果报告单（或将鼠标指在需要导出的结果项，右键点击Export to…选择所需结果导出格式即可输出结果）。

5.关闭仪器

实验结束后依次关闭CFX Manager软件、定量PCR仪电源、电脑电源，最后取出反应管/板。

二、注意事项：

1.仪器使用前请连接稳压电源；

2.仪器开盖（Open Lid）和关盖（Close Lid）需用程序操作，不可使用仪器开、关盖按钮强制执行；

3.使用结束及时关闭仪器。